Performance of an rFC-based assay for endotoxinquantification in hyperimmune sera
Vigil Sanit Debate, Rio de Janeiro, 2025, v.13: e02447 | Published on: 23/10/2025
DOI:
https://doi.org/10.22239/2317-269X.02447Palavras-chave:
Fator C Recombinante, Endotoxinas, Soro Hiperimune, Técnicas in vitroResumo
TÍTULO PT: Desempenho de um ensaio baseado em Fator C recombinante para a quantificação de endotoxinas em soros hiperimunes
Introdução: A contaminação por endotoxinas representa um risco significativo à segurança de produtos farmacêuticos, especialmente aqueles administrados por via parenteral. Garantir a segurança dos pacientes exige estrita conformidade com os padrões regulatórios para formulações farmacêuticas estéreis e livres de pirogênio. Objetivo: Avaliar a viabilidade do uso do método baseado no Fator C Recombinante (FCr), especificamente o Endolisa®, para a detecção de endotoxinas bacterianas em soros hiperimunes (pentavalente antibotrópico, antirrábico e antitetânico). Método: As amostras foram contaminadas com soluções de endotoxinas em concentrações variando de 0,05 a 10 UE/mL e analisadas utilizando o kit Endolisa®. Foram avaliados parâmetros de desempenho como especificidade, limites de detecção e quantificação, precisão, exatidão e linearidade. Cada concentração foi testada no mínimo cinco vezes em seis pontos diferentes. Resultados: O método apresentou precisão, com desvios-padrão relativos entre 3,5% e 19,0%, e exatidão, com recuperação de endotoxinas variando de 94,0% a 134,0%. Além disso, demonstrou correlação linear para o intervalo entre 0,05 e 5 UE/mL para os três soros analisados na diluição 1:100. Os limites de detecção e quantificação foram definidos em 0,05 UE/mL. Conclusões: Os resultados confirmam que o método empregando FCr permite uma quantificação precisa, exata, específica e linear de endotoxinas em soros hiperimunes no intervalo de 0,05 a 5 UE/mL. No entanto, para amostras contaminadas com 10 UE/mL (diluição 1:100), o método não atendeu aos critérios compendiais.
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Biografia do Autor
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Ellen Gameiro Hilinski, Núcleo de Ensaios Biológicos e de Segurança, Centro de Medicamentos, Cosméticos e Saneantes, Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, SP, Brasil | Departamento de Farmácia, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil
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Daniela Dal Molim Ghisleni, Departamento de Farmácia, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil
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Carla Lilian de Agostini Utescher, Laboratório de Virologia, Instituto Butantan, São Paulo, SP, Brasil
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Wagner Quintilio, Laboratório de Biotecnologia Viral, Instituto Butantan, São Paulo, SP, Brasil
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Terezinha de Jesus Andreoli Pinto, Departamento de Farmácia, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil
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Os conteúdos subjacentes ao texto da pesquisa estão contidos no manuscrito submetido e na tese de doutorado disponibilizada em: https://repositorio.usp.br/item/003218090
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